Acetonitril ist in verschiedenen Graden erhältlich und wird häufig im Labor eingesetzt:

• Als polares aprotisches Lösungsmittel für verschiedene organische Reaktionen
• Für Anwendungen wie Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (HPLC)
• Bei Umkehrphasen-HPLC als Alternative zu Methanol

In der Industrie wird es zudem auch als Lösungsmittel bei der Herstellung von Produkten wie Pharmazeutika, Pestiziden und Parfümen verwendet.

Bei Erhitzen gibt Acetonitril hochgiftige Hydrogencyanid-Dämpfe ab und produziert bei Reaktion mit Wasser, Dampf oder Säuren entzündliche Dämpfe. Die Exposition gegenüber Acetonitril durch Flüssigkeiten oder Dampf kann zur Reizung von Augen, Nase und Atemwegen führen. Eine Langzeitexposition kann zur Schädigung des Nervensystems führen. Anwender sollten Schutzhandschuhe und geeigneten Augen- und Gesichtsschutz tragen und ein Einatmen der Dämpfe vermeiden. Acetonitril sollte nicht in die Nähe von Flammen, heißen Oberflächen und Zündquellen gelangen und in einem gut belüfteten, kühlen, dicht verschlossenen Behälter aufbewahrt werden.